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細胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)環(huán)境中最重要的組成部分,是人工模擬細胞在體內生長的營養(yǎng)環(huán)境,主要為細胞提供必要的營養(yǎng)、生長因子和激素等70~100種不同化學成分,并調節(jié)培養(yǎng)物的pH值和滲透壓。血清是細胞培養(yǎng)中的一個重要營養(yǎng)來源,可以為細胞提供基本的營養(yǎng)物質、細胞增殖所需的生長因子、促接觸和伸展因子、結合蛋白、激素和蛋白酶抑制劑等,因此在細胞培養(yǎng)基中常會添加血清。但血清存在很多問題,如:(1)動物血清的成分復雜,雖然大部分成分已知,但仍然存在不清楚的成分;(2)動物血清的成分及含量會因動物性別...
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RNA提取試劑盒用于從細胞、組織、新鮮血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA,用LB10裂解樣品后,加入氯仿,溶液分為無色水相和粉紅色有機相,RNA在水相中;用RNA硅膠膜離心柱特異地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA),流出液中的smallRNA用miRNA硅膠膜離心柱特異地吸附。與其它miRNA提取方法相比,該試劑盒裂解能力強、提取量高、專一性強,應用范圍廣。RNA提取試劑盒其主要特征在于分離裝置中采用纖維素為固相載體,利用融...
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昆蟲細胞培養(yǎng)基為昆蟲細胞的生長、增殖、分化提供了重要保障。昆蟲細胞培養(yǎng)基的發(fā)展經歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基三個階段。隨著昆蟲桿狀病毒表達載體系統(tǒng)(BEVS)的廣泛應用,以草地貪夜蛾細胞株Sf9和Sf21,以及粉紋夜蛾細胞株Tn5B1-4(商品名HighFive)為主的昆蟲細胞體外培養(yǎng)越來越受重視,昆蟲細胞培養(yǎng)基也越來越受到關注。目前應用廣泛的商品化基礎培養(yǎng)基主要是Grace’s培養(yǎng)基、TC-100培養(yǎng)基和IPL-41培養(yǎng)基。現(xiàn)有的培養(yǎng)基是在分析昆蟲血淋巴的化學組...
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血清是生長和附著因子、礦物質、脂質和激素的來源,是細胞培養(yǎng)的重要組分。血清能調節(jié)細胞膜的通透性,同時能作為載體攜帶酶、脂質、酶和微量元素等進入細胞。血清質量的好壞決定了細胞的生長狀態(tài)。市面上的血清,有的有輻照處理,有的沒有,他們有什么區(qū)別嗎?實驗使用的時候,如何選擇呢?國際上,對于藥品、食品、醫(yī)療的滅菌通常會采用輻照滅菌的方法,即利用電離輻射殺死微生物的方法。輻照血清,將正常血清經過三次無菌過濾后,采用25KGy劑量的鈷-60γ射線照射所得到的血清,目的是去除血清中的微生物,...
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血清是生長和附著因子、礦物質、脂質和激素的來源,是細胞培養(yǎng)的重要組分。血清能調節(jié)細胞膜的通透性,同時能作為載體攜帶酶、脂質、酶和微量元素等進入細胞。在使用的過程中,到底是選擇沒有滅活的血清?還是選擇熱滅活血清?有啥區(qū)別嗎?熱滅活可以破壞血清中補體的活性。哺乳動物血清中存在的補體蛋白參與細胞的溶解,收縮平滑肌,刺激細胞和血小板釋放組胺,并激活淋巴細胞和巨噬細胞。有研究比較了正常熱滅活胎牛血清對各種細胞株的生長能力影響(如下圖所示),發(fā)現(xiàn)11株細胞中,熱滅活對6株細胞有負面影響(...
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